Spectrofotometer

• Voeding
• MBO
• Studiejaar 1

Spectrofotometer

Kleur vloeistoffen zien en meten

* Vloeistoffen hebben kleuren.
* “het zien” van de intensiteit van de kleur geeft aan of er veel of weinig van die kleurstof in de vloeistof is opgelost
* Wanneer we “het zien” vervangen door “het meten” = fotometrie
* Een fotometer meet fotonen ofwel lichtdeeltjes. 
* Vaak wordt hiervoor nog het woord "spectro" geplaatst (afkomstig van het woord spectrum)

Spectrofotometer

De spectrofotometer wordt gebruikt voor het meten van de intensiteit van licht bij verschillende golflengten en worden veelal toegepast in scheikunde, biologie, fysica en andere wetenschappelijke disciplines.

Spectrofotometer en voeding

kwaliteitscontrole, voedingsanalyse en productontwikkeling

* kleurmeting

* vetgehaltebepaling (infraroodspectrofotometrie)

* eiwitbepaling (Bradford-assay / Kjeldahl-methode)

* sucrosegehaltebepaling

* vitamineanalyse

* allergenen en contaminanten

* waterconcentratie

Spectrofotometer

Het doel van een spectrofotometer is om de intensiteit van licht te meten bij verschillende golflengten in een spectrum. 

* Het meet hoeveel licht er wordt doorgelaten 
door de vloeistof.
* Hoe lager de concentratie hoe meer licht wordt 
doorgelaten, hoe hoger de concentratie hoe 
minder licht wordt doorgelaten.

Spectrofotometer schematisch

Kleurencirkel

kleurencirkel grof beeld

golflengte = maximale 

absorptie licht

Intensiteit licht

De intensiteit van het licht hangt af van:
* de lichtbron
* de golflengte
* de cuvet
* de oplossing

cuvet

* glas, kwartsglas of plastic

* glas het meest gebruikt,  laat licht door in het zichtbare gebied van het

spectrum

* cuvet overal even dik zal moeten zijn, dat er geen verontreinigingen in mogen

zitten, geen beschadigingen, enz

* kwartsglas kan gebruikt worden in het hele gebied van UV-VIS

* veel duurder

* plastic ook wel weggooicuvet

* plastic kan gebruikt worden in het hele gebied van UV-VIS gebruiken

Waar moet je op letten met meten:

* De oplossing moet helder zijn

* De temperatuur moet tijdens de meting constant zijn

* Er mag geen chemische reactie plaatsvinden

* De standaardoplossingen en monsters moeten precies gelijk zijn wat betreft oplosmiddelen en zuurgraad (pH)

Spectrofotometische waarde

Afhankelijk van de eigenschap die wordt gemeten:

Absorptiecoëfficiënt (absorptiewaarde) (A), geen eenheid

Transmissie (%T), geen eenheid

Concentratie (mol/L, mg/L)

Extinctiecoëfficiënt (molaire absorptiviteit) (1/M.cm, L/mol.cm, cm²/mg)

Spectrofotometing resultaten

Registratieformulier:

• datum
• monster / oplossing
• Spectrofotometerinformatie; merk en model van spectrofotometer, serienummer van spectrofotometer (extra)
• meetomstandigheden; temperatuur (°C), locatie
• operator; wie de bepaling doet
• norm en tolerantie

Spectrofotometing resultaten

Kalibratiegegevens:

Kalibratieoplossingen gebruikt:  

Resultaten van kalibratie:

Spectrofotometing resultaten

Spectrofotometingen: 

Monster 1:

tijdstip van meting

gemeten spectrofotometer-waarde

Monster 2:

tijdstip van meting

gemeten spectrofotometer-waarde

Monster 3:

tijdstip van meting

gemeten spectrofotometer-waarde

Spectrofotometer opdrachten

Maak het werkblad - inleveren 11-10-2024 17:00 uur

Gebruik hiervoor:

theorieles Cindy

theorieles Nicky

De Groene Wereld/Het ontwikkelcentrum

internet/boeken

handleiding apparatuur lab

Maak dit werkblad op melk of olijfolie