Microbiologie les 5

• Biologie
• MBO
• Studiejaar 2

Microbiologie les 5

Vandaag: 

- planning vrijdag

- tijdsregistratie?

- zelf een planning maken

Vrijdag

- gietplaten tellen

- bonte rij aflezen

- exp. 8 uitvoeren

Leerdoelen

Aan het einde van de praktijkles kan je..

- een conclusie trekken over E. coli in filet americain.

- een advies geven over de kwaliteit van filet americain en de betrouwbaarheid van de analyse.

Wat weten jullie over E. coli?

E. coli

Gramnegatieve, staafvormige bacterie

Facultatief anaeroob

Komt voor in de darmen van warmbloedige dieren

Speelt een rol bij vertering en vitamine K-productie

Kan indicator zijn voor fecale besmetting in voedsel en water

Wat betekent het dat E. coli een “indicatorbacterie” is?

1. Het veroorzaakt altijd ziekte
2. Het geeft aan dat er mogelijk uitwerpselen aanwezig zijn
3. Het maakt voedsel veiliger
4. Het produceert insuline

Doel van exp. 8

Bepalen van het kiemgetal van E. coli in filet americain

Nagaan of het product veilig is voor consumptie

Oefenen met verdunningsreeks, VRBL/VRBG platen en de bonte rij

Het kiemgetal van E. coli zegt iets over de hygiëne van het product.

1. Waar
2. Niet waar

Werkwijze

Dag 1:

Verdunningsreeks maken van monster A en B (filet americain)

Spreidplaten maken op VRBL en VRBG agar: selectief voor E. coli. 

Dag 2:

Platen tellen (kiemgetal bepalen!)

Gramkleuring maken van twee kolonies van de VRBL plaat

Dezelfde twee kolonies moet je een bonte rij van inzetten. Veel buizen!

Bonte rij: testen van verschillende biochemische eigenschappen

Dag 3 (tijdens praktijkvoorbereiding):

Aflezen bonte rij.

Als je filet americain ontvangt, wat moet je daar als eerste mee doen om een verdunningsreeks te kunnen maken?

Hoe maak je een spreidplaat?

Wat controleer je ook alweer met een bonte rij?

Bonte rij

Het is een reeks buisjes met verschillende stoffen waarin je bacteriën zet.

Elk buisje test één eigenschap van de bacterie.

Bij onze bonte rij

- Kunnen ze suikers verteren? (glu = glucose, lac = lactose, sac = sacharose)

- Kunnen ze diwaterstofsulfide maken? (H₂S)

- Kunnen ze bepaalde stoffen afbreken of gebruiken? (indol, citraat, urease)

- Hebben ze bepaalde enzymen? (oxidase, katalase)

Waarom doen we het?

Iedere bacterie heeft een eigen patroon van buisjes

Zo kunnen we zien welke bacterie het is (bijvoorbeeld E. coli, Salmonella of Enterobacter)

dus.. bonte rij = het “vingerafdruk-profiel” van een bacterie

Wat is een bonte rij?

Tabel 8.1: Wat je verwacht per bacteriesoort

Dus.. to do vrijdag

• Platen tellen van gesneden groente
  
• Beoordelen van de bonte rij
• Verdunningsreeks maken van monster A en B (in tweetallen: één doet monster A, ander doet monster B).
•  VRBL en VRBG platen maken en verdunningen uitspreiden

Aan de slag!

Maak een tijdsplanning van de "to do" op vrijdag.

Bij vragen, stel ze aan mij.

Klaar? Maak de voorbereidende vragen van exp. 8 (exp. 8 gewoon volgen zoals het voorschrift!).

Wat zou je nog een keer extra willen oefenen?

VRBL/VRBG agar maken

Reinstrijk

Spreidplaat

Gietplaten

Kiemgetal bepalen/berekenen

Stomachen

Verdunningsreeks maken

Bonte rij

Conclusie trekken / verwerken van resultaten

Wat wil je nog een keer oefenen?