PCR

1 / 27
next
Slide 1: Link
BiotechniekSecundair onderwijs

This lesson contains 27 slides, with interactive quizzes, text slides and 2 videos.

time-iconLesson duration is: 100 min

Items in this lesson

Slide 1 - Link

This item has no instructions

Wat weten jullie nog over...
DNA

Slide 2 - Mind map

Volg de les om uit te zoeken of het waar is wat je denkt te weten over DNA

Slide 3 - Video

This item has no instructions

Slide 4 - Slide

This item has no instructions

Leerdoel
B 9 - verschillende
gespecialiseerde
laboratoriumtechnieken
omschrijven in functie
van de gekozen
contexten. 
• materiaalkennis; 
• bereidingen en oplossingen; 
• werkingsprincipes.

Slide 5 - Slide

This item has no instructions

PCR
Polymerase Chain Reaction


polymerasekettingreactie
techniek om DNA te vermeerderen
Meer DNA is makkelijker te zien
Gaat vooraf aan elke DNA analyse!

Slide 6 - Slide

This item has no instructions

Wat zou je met DNA-analyse kunnen doen?

Slide 7 - Open question

This item has no instructions

Slide 8 - Video

This item has no instructions

Wat is er nodig voor de PCR-techniek uit te voeren?
Benodigdheden?

Slide 9 - Open question

This item has no instructions

* origineel DNA = Target DNA - Doelwit DNA - Template DNA
* Buffer (optimale pH) met MgCl2
* Taq DNA-Polymerase of kortweg Taq-Polymerase
* Primers
* dNTP - desoxyribonucleosidetrifosfaat
desoxyadenosinetrifosfaat (dATP), desoxyguanosinetrifosfaat (dGTP), desoxythymidinetrifosfaat (dTTP) en desoxycytidinetrifosfaat (dCTP)
PCR


Benodigdheden

Slide 10 - Slide

This item has no instructions

Slide 11 - Link

This item has no instructions

Wat zijn de verschillende stappen van PCR?

3 stappen in eigen woorden

Slide 12 - Open question

This item has no instructions

Slide 13 - Slide

This item has no instructions

* Start materiaal = Target = originele DNA streng
* DNA amplificeren om te kunnen analyseren
* Controle: positief/negatieve controle
* Controle van de primers met target DNA
=> gel elektroforese


SAMPLE

Slide 14 - Slide

This item has no instructions

Slide 15 - Slide

This item has no instructions

Slide 16 - Slide

This item has no instructions

Stap 1: Denaturatie
- de dubbele helix vorm van het DNA wordt verbroken
- 95°C gedurende 15s tot 2 minuten
- de H-bruggen tussen de basen verbreken, difosforesterverbindigen worden niet beschadigd.


 


Slide 17 - Slide

This item has no instructions

Stap 2: Hybridisatie/ annealing/ renaturatie
 - twee primers, elke primer hecht aan één specifieke streng:
  sense primer (of forward primer) die hecht aan de 3’  5’ – streng 
  antisense primer (of reverse primer) aan de 5’  3’ – streng 
- 40-60 °C (deze lagere temperatuur is nodig zodat de primers niet inactief zouden worden)
- maximum 1 minuut

 


Slide 18 - Slide

This item has no instructions

Primer
een basensequentie die complementair is aan de basen die aan de twee uiteinden van het te vermenigvuldigen DNA-fragment
* 20-30 nucleotiden
* Niet complementair aan elkaar
* Zo specifiek dat het maar op 1 gen past en zodus vermeerderd

Slide 19 - Slide

This item has no instructions

Stap 3: DNA-synthese/ polymerisatie/ primerextentie
- aanhechten van complementaire dNTP op de DNA-enkelstrengen
- enzym Taq DNA-polymerase: optimumtemperatuur 72°C, stabiel tot 95°C
- polymerisatie in de  5’ - 3’-richting 
(Soms is de temperatuur van annealing en polymerisatie dezelfde en kan dit dus in één stap uitgevoerd worden) 


 


Slide 20 - Slide

This item has no instructions

1
2
3
Welke toepassingen vind je terug in deze tekst?
Beschrijf kort de toepassing en de functie/meerwaarde van PCR.
4
Toepassing PCR - eigen artikel zoeken
Wetenschappelijk correct artikel, betrouwbare bron

Slide 21 - Slide

This item has no instructions

Welke toepassingen vond je terug in de artikels?


Slide 22 - Open question

This item has no instructions

Kan je zomaar elk stuk DNA amplificeren
met de PCR techniek?
A
JA, geen voorwaarden
B
NEE, verschillende beperkingen
C
JA, mits de juiste primers
D
NEE, enkel DNA van mensen en dieren

Slide 23 - Quiz

This item has no instructions

Wat hebben
we nodig
voor de PCR techniek?

Slide 24 - Mind map

This item has no instructions

Sleep de termen naar de juiste plaats
Tekst
Target DNA
Eigenschappen STAP 1
Eigenschappen 
Stap 2
Eigenschappen 
stap 3
Annealing
Denaturatie
Hybridisatie
Renaturatie
Hogere temperatuur -90°C
40-60°C
TAQ-Polymerase
Polymerisatie
Sense primer
Anti sense primer

Slide 25 - Drag question

This item has no instructions

https://www.kwrwater.nl/onderzoek/enabling-technologies/hydrogenomica/
1
2
3
Welke toepassingen vind je terug in deze tekst?

Slide 26 - Slide

This item has no instructions

stap 1 Denaturatie
stap 2 Hybridisatie
stap 3 Polymerisatie

Slide 27 - Slide

This item has no instructions