Klassikaal: Theorie les 1 BMI

• Dierverzorging
• MBO
• Studiejaar 2

Les 1 - theorie BMI

Vandaag: waarom doen we de verschillende stappen tijdens DNA isolatie?

Planning theorie

Planning vandaag

- wat weten jullie nog over DNA isolaties?

- kort bespreken welke reagentia betrokken zijn bij DNA isolaties

- zelfstandig aan de slag

- klassikale vraag op lessonup

Leerdoel: Aan het einde van de les kan je..

uitleggen welke functie de verschillende stappen en reagentia hebben in een DNA-isolatieprotocol, zoals de rol van proteinase K, RNAse A, lysis buffer, bindingsbuffer, wasstappen en elutie. 

Wat weten jullie nog over DNA-isolaties?

Reagentia in DNA isolatie: DNA vrij maken

1

2

3

Vraag aan studenten: waarom zou je 

Reagentia in DNA isolatie: DNA binden en wassen

4

5

Reagentia in DNA-isolatie: DNA elueren

Aan de slag

Wat?

• Ga naar klassencode pcqfg op LessonUp
• Open les "Zelfstandig: Theorie les 1 BMI"
• Maak de opdrachten - elke opdracht heeft een duidelijke instructie

Hoe?

• Iedereen doet dit zelfstandig. Bij vragen eerst je buurman/buurvrouw, daarna stel je die aan mij.

Hoelang?

• Jullie krijgen hier de hele les voor, op de laatste 10 minuten na.
• Aan het einde controleer ik of jullie het begrijpen met een paar vragen.

Klaar? Ga verder met de praktijkvoorbereiding: lees het praktijkvoorschrift goed door!

Sleep de juiste functie naar de juiste component.

Functie

Component

DNA van het kolom afhalen

Vervuilende stoffen verwijderen om zuiver DNA te krijgen

DNA binden aan het kolom

Afbreken van eiwitten

Afbreken van RNA

Het celmembraan kapot maken

Waar dient het ethanol voor in het wasbuffer?

1. Om DNA op te lossen
2. Om enzymen te activeren die DNA knippen
3. Om RNA af te breken
4. Om vervuilende stoffen te verwijderen, terwijl het DNA aan de spinkolom blijft plakken

De meeste enzymen werken het beste op 37 °C. Toch moeten we het mengsel met lysisbuffer, RNAse A en Proteinase K opwarmen tot 56 °C. Hoe komt dat?

1. Omdat RNAse A het beste werkt bij 56 °C, en proteinase K hittebestendig is
2. Omdat proteinase K het beste werkt bij 56 °C, en RNAse A hittebestendig is (tot 60 °C)

Ik heb een keer in het lab geen ethanol toegevoegd aan mijn wasbuffer. Mijn hele experiment was helaas mislukt; ik had geen DNA meer! Waarom is het belangrijk om ethanol toe te voegen aan je wasbuffer?