Klassikaal: Les 2 PCR

Les 2: PCR

Vandaag

- uitleg over PCR

- zelf aan de slag met een PCR simulator

Leerdoelen

• Je kan uitleggen wat een polymerase chain reaction (PCR) is.
• Je kan de functie van elk component beschrijven (Taq-polymerase, dNTP’s, primers, template-DNA, Mg²⁺, buffer).

Wie weet nog welke stappen er zijn bij PCR?

Waar zou je PCR voor kunnen gebruiken?

Wat is PCR?

een kopieermachine voor DNA

PCR gebeurt niet zomaar - componenten nodig!

Component	Functie
Template DNA	DNA waar een stukje van gekopiëerd wordt
Taq-polymerase	Synthetiseert nieuw DNA
Primers (Forward en reverse)	Startpunt voor Taq-polymerase
Mg2+	Activeert Taq-polymerase
dNTP's	Bouwstenen om het gekopiëerde DNA te maken
Buffer	Zorgt voor juiste omstandigheden, zodat de reactie goed verloopt.

Componenten in PCR reactie

Sleep de functie naar de juiste componenten.

Template DNA

Magnesium

Buffer

Primers

Taq-polymerase

dNTP's

Zorgt voor juiste omstandigheden, zodat de reactie goed verloopt.

Bouwstenen om het gekopiëerde DNA te maken

Startpunt voor Taq-polymerase

Activeert Taq-polymerase

Synthetiseert nieuw DNA 

DNA waar een stukje van gekopiëerd wordt

Stappen in PCR

1. Denaturatie: Het template DNA enkelstrengs maken (95 C)

Stappen in PCR

2. Annaeling: Primers binden aan het enkelstrengs DNA (50-65 C). Temperatuur is afhankelijk van de primer.

Stappen in PCR

3. Extensie: Het synthetiseren en verlengen (extensie) van nieuw stukje DNA door Taq-polymerase en dNTP's (72 C)

Leg in je eigen woorden uit wat de drie stappen van een PCR reactie zijn.

Aan de slag

Wat? Maak de zelfstandige Lesson-Up: Zelfstandig: Les 2 PCR.

Hoe? Dit doe je individueel, bij hulp vraag je het eerst je buurman/buurvrouw.

Hoelang? De hele les, op de laatste 5 minuten na.

Uitkomst? Je bent klaar met de zelfstandige LessonUp en begrijpt een PCR beter.

Klaar? Ga verder met je praktijkvoorbereiding.

https://www.labxchange.org/library/items/lb:LabXchange:f7f6962a:lx_simulation:1?fullscreen=true