Thema 10
DNA
B2
DNA-replicatie
Thema 10
DNA
B2
DNA-replicatie
Lesprogramma Les 1
Leerdoelen B2 (2 minuten)
Uitleg leerdoel 10.2.1 'DNA-replicatie en telomeren' (25 minuten)
Zelfstandig opdracht 14 t/m 17 maken
Oefen de Flitskaarten en maak Test Jezelf als laatste
Lesafsluiter B2 deel 1 (5 minuten)
Eerder klaar?
Neem deel 2 van B2 alvast een keer door!
Leerdoelen B2
10.2.1 Je kunt uitleggen hoe DNA-replicatie plaatsvindt.
10.2.2 Je kunt uitleggen hoe de basenvolgorde van DNA kan worden bepaald.
10.2.3 Je kunt uitleggen hoe DNA-analyse kan worden toegepast om verwantschap tussen organismen vast te stellen.
Onderwerpen: celcyclus, DNA-replicatie, helicase vormt replicatiebel, primer bindt aan DNA, DNA-polymerase maakt nieuw DNA, constante en onderbroken replicatie, telomeren en veroudering, PCR, sequencen, gelelektroforese, nieuwe technieken, DNA-Fingerprinting en restrictie-enzymen
DNA-replicatie (1)
Celcyclus: een cyclus waarbij cellen zich delen, groeien, hun DNA kopiëren en zich opnieuw delen.
Celdeling (M-fase) vindt plaats om onder andere cellen te vervangen of te kunnen groeien.
Het kopiëren van DNA oftewel DNA-replicatie is nodig tijdens de celdeling, specifieker tijdens de S-fase
In het kort verloopt DNA-replicatie als volgt:
De twee DNA-strengen worden van elkaar gescheiden door het enzym helicase.
Een primer bindt op de plek van het enkelstrengs DNA waar de nieuwe streng moet worden gemaakt.
Het enzym DNA-polymerase bindt aan de primer en synthetiseert (maakt) een nieuwe streng DNA, waardoor het enkelstrengs DNA weer dubbelstrengs DNA wordt.
DNA-replicatie (2)
Replicatie begint met een primer, waarvan het enzym DNA-polymerase langs de keten kan schuiven en A, T, C en G binden. Twee fosfaatgroepen splitsen af en deze geven de energie af voor de binding.
DNA-polymerase heeft een afleesrichting van het 3'-uiteinde naar het 5'-uiteinde. De nieuwe streng wordt dus gemaakt van 5' naar 3'.
DNA-replicatie (3)
De leidende streng (leading streng) is gemaakt.
Zoals gezegd kan DNA-polymerase alleen van het 3'-5' uiteinde aflezen, in de andere richting kan DNA-polymerase alleen kleine stukjes DNA (Okazaki fragmenten) synthetiseren. De RNA primers worden vervangen door DNA-nucleotiden. Het enzym DNA-ligase koppelt ten slotte de Okazaki-fragmenten aan elkaar. Hierdoor wordt de volgende streng (lagging streng) gevormd.
Paar vragen...
Wat doet primase daar?
Hoe heet het enzym dat de Okazaki-fragmenten aan elkaar verbindt?
Welke Binas- tabel bevat veel informatie over DNA-replicatie?
Zet de 7 stappen van replicatie in de juiste volgorde
1
2
3
4
5
6
7
Primase maakt korte RNA primers die functioneren als startpunt van DNA polymerase
Ligase verbindt alle DNA fragmenten aan elkaar.
RNA-primers worden vervangen door DNA-nucleotiden
Helicase haalt de dubbele DNA strengen uit elkaar
DNA polymerase bindt een primer en verlengd deze aan de 3' uiteinde.
Telomeren en
veroudering
Het DNA-molecuul wordt bij elke celdeling korter.
Om te voorkomen dat de genen in het DNA worden beschadigd, hebben de chromosomen van eukaryoten telomeren: niet-coderend, repetitief DNA aan de uiteinden van een DNA-molecuul dat is ingekapseld in beschermende eiwitten.
Na ongeveer 50 celdelingen is de telomeer zo kort dat de cel zich niet meer kan delen en overgaat tot apoptose (geprogrammeerde celdood).
De levensduur van de cellen van een organisme hangt af van de lengte van de telomeren en de snelheid waarmee ze korter worden.
Maak opdrachten uit planner
Volgende les:
PCR, sequencen, gelelektroforese, nieuwe technieken, DNA-fingerprinting en restrictie-enzymen
Lesafsluiter B2
(leerdoel 1)
10.2.1 Je kunt uitleggen hoe DNA-replicatie plaatsvindt.
10.2.2 Je kunt uitleggen hoe de basenvolgorde van DNA kan worden bepaald.
10.2.3 Je kunt uitleggen hoe DNA-analyse kan worden toegepast om verwantschap tussen organismen vast te stellen.
Wat was je procentuele score?
Les 2
PCR
sequencen,
gelelektroforese
nieuwe technieken
DNA-fingerprinting en restrictie-enzymen
B2 leerdoel 2 en 3
10.2.1 Je kunt uitleggen hoe DNA-replicatie plaatsvindt.
10.2.2 Je kunt uitleggen hoe de basenvolgorde van DNA kan worden bepaald.
10.2.3 Je kunt uitleggen hoe DNA-analyse kan worden toegepast om verwantschap tussen organismen vast te stellen.
Onderwerpen: celcyclus, DNA-replicatie, helicase vormt replicatiebel, primer bindt aan DNA, DNA-polymerase maakt nieuw DNA, constante en onderbroken replicatie, telomeren en veroudering, PCR, sequencen, gelelektroforese, nieuwe technieken, DNA-Fingerprinting en restrictie-enzymen
PCR
(Polymerase Chain Reaction)
Het DNA dat uit cellen van een organisme wordt geïsoleerd, is meestal te weinig voor vervolganalyse
Met PCR (Polymerase Chain Reaction) kunnen een of meer specifieke gedeelten uit het DNA in een PCR-machine worden gekopieerd:
Dubbelstrengs DNA wordt enkelstrengs DNA.
Aanhechting primer aan DNA door daling temperatuur. Speciaal ontworpen primers binden alleen rond het specifieke deel van het DNA dat moet worden gerepliceerd (bijvoorbeeld een gen).
Hittebestendige DNA-polymerase synthetiseert de nieuwe strengen m.b.v. de vrije nucleotiden.
Tijdens een PCR wordt dit meestal zo’n dertig keer herhaald, DNA neemt exponentieel toe.
PCR
Vervolgens kun je een DNA-profiel of DNA-fingerprint maken d.m.v. gelelektroforese. Je bepaalt daarmee de nucleotidevolgorde van het DNA (sequensen).
Voor het bepalen van een DNA-profiel worden beide allelen van minimaal tien onafhankelijk overervende loci met repetitief DNA onderzocht (zogenaamde repeats).
Repetitief DNA (bijv. CACACACA) bevindt zich in bepaalde loci van niet-coderend DNA. Dit is voor elke persoon zo uniek, waardoor je er iemand mee kunt identificeren.
DNA-sequencen
Het bepalen van de basenvolgorde van een stuk DNA
Stuk DNA wordt eerst miljoenen malen gekopieerd d.m.v. PCR
Je gebruikt de leidende streng
Een methode voor sequencing is een speciale PCR die wordt gevolgd door gelelektroforese (scheiden van DNA-fragmenten op grond van hun grootte).
Animatie: DNA-sequencing
Animatie: gel-elektroforese
Extra uitlegvideo nodig?
DNA-fingerprinting en restrictie-enzymen
DNA-fingerprinting: DNA profielen van organismen vergelijken om zo afkomst te kunnen bepalen of organismen te kunnen identificeren
Locus: een sequentie die bij verschillende individuen op dezelfde plek in het DNA zit
Restrictie-enzymen: enzymen die specifieke DNA-sequentie (4 t0t 8 nucleotiden) herkennen en hier op een unieke manier het DNA knippen
DNA-fingerprinting
Repetitief DNA in niet-coderend DNA, aantal herhalingen verschilt per persoon
DNA eerst isoleren uit de kern van de cel
PCR om DNA te vermeerderen
Restrictie-enzymen knippen loci met repetitief DNA uit DNA
Alle geproduceerde stukjes DNA scheiden, sorteren op grootte en zichtbaar maken/op lengte van elkaar gescheiden d.m.v. gel elektroforese)
Extra informatievideo over
restrictie-enzymen
Huiswerk
Maak opdracht 18 t/m 26
Oefen de Flitskaarten en controleer de leerdoelen
van B2 met de Test Jezelf
Klaar?
Neem de Context 'Whole genome sequencing' door en
maak opdracht 27 t/m 29
Lesafsluiter B2
10.2.1 Je kunt uitleggen hoe DNA-replicatie plaatsvindt.
10.2.2 Je kunt uitleggen hoe de basenvolgorde van DNA kan worden bepaald.
10.2.3 Je kunt uitleggen hoe DNA-analyse kan worden toegepast om verwantschap tussen organismen vast te stellen.
Zet de 7 stappen van replicatie in de juiste volgorde
1
2
3
4
5
6
7
Primase maakt korte RNA primers die functioneren als startpunt van DNA polymerase
Ligase verbindt alle DNA fragmenten aan elkaar.
RNA primers worden vervangen door DNA nucleotiden
replicatie start bij een ori (replicatie startpunt)
single strand binding proteins voorkomen dat het dna weer dubbelstrengs wordt.
Helicase verbreekt de waterstofbruggen en maakt dsDNA ssDNA
DNA polymerase bindt een primer en verlengd deze aan de 3' uiteinde.
Primase
RNA Primer
SSBP's
DNA-polymerase
Helicase
Okazaki fragment
DNA-ligase
Wat is een primer?
Stukje DNA gemaakt door ligase
Stukje RNA gemaakt door primase
Stukje RNA gemaakt door polymerase
Stukje DNA gemaakt door helicase
Hoe wordt een DNA molecuul altijd afgelezen?
Van 5' uiteinde naar 3' uiteinde
Van 3' uiteinde naar 5' uiteinde
In DNA vormen de basen A, G, C en T vaste paren. Welke paren zijn dat?
A - G en T - C
A - T en G - C
Op internet staan veel plaatjes van DNA. Heeft de tekenaar van dit plaatje de basen goed getekend?
Ja
Nee
voor replicatie is/zijn benodigd
DNA
DNA polymerase
vrije nucleotiden
alle drie
In welk deel van de celcyclus vind DNA replicatie plaats?
G1 fase
G2 fase
S fase
M fase
Doelstelling 10, vraag 1 -Bep zegt dat DNA-replicatie plaatsvindt tijdens de interfase. -Pieter zegt dat na DNA-replicatie een chromosoom uit twee chromatiden bestaat. Wie heeft (hebben) gelijk?
Geen van beiden
Alleen Bep
Alleen Pieter
Beiden
DNA-profiel
verwantschap familie
forensisch onderzoek
Wie is de dader?
DNA fingerprints die gebruikt worden in de rechtszaal lijken een beetje op de streepjescodes zoals je die op produkten in de supermarkten aantreft. Het patroon van de streepjes in een fingerprint komt overeen met
de aanwezigheid van DNA-fragmenten van verschillende grootte
de volgorde van de genen op bepaalde chromosomen
de aanwezigheid van dominante en recessieve allelen voor bepaalde eigenschappen
de volgorde van basen in een bepaald gen
Wat is een restrictie-enzym?
Is gelabeld nucleotide gebruikt bij sequencen
Verbreekt waterstoffenbruggen bij replicatie
Kan Okazaki-fragementen aan elkaar koppelen
Herkent specifieke nucleotidesequentie en knippen DNA daar door
Organismen van verschillende soorten kunnen veel overeenkomsten vertonen in de samenstelling van stoffen, bijvoorbeeld van DNA. Waarom is deze overeenkomst een argument voor de evolutietheorie?
Omdat deze overeenkomst aantoont dat soorten veranderen, doordat mutanten blijven voortbestaan en individuen van de oorspronkelijke vorm uitsterven.
Omdat hieruit kan worden afgeleid hoe lang geleden de verschillende soorten zijn ontstaan.
Omdat deze overeenkomst het aannemelijk maakt dat verschillende soorten een gemeenschappelijke voorouder hebben.