Zelfstandig Les 6 TIM

• Biologie
• MBO
• Studiejaar 2

Resultaten verwerken ELISA

In deze zelfstandige LessonUp ga je de resultaten verwerken van de ELISA.

Ik leg stap voor stap uit hoe dit moet (met "neppe" cijfers)

Bij vragen, eerst je buurman/buurvrouw vragen, daarna aan mij. Succes!

Open je document van je ELISA resultaten.

Dit document heb ik vrijdagmiddag op 6 juni naar jullie gestuurd.

Je ziet dan de volgende cijfers

Kopiëer de cijfers van je optische dichtheid.

Plak ze ergens anders in het Excel document, bijvoorbeeld in rij 13.

Plak in de rij boven je optische dichtheid cijfers de cijfers van de internationale eenheden/liter van je ijklijn.

Dit zijn de cijfers van je ijklijn van de experiment: de 4000 t/m 0,6. 

Doe nu de optische dichtheid min de blanco.

Dat kun je doen in Excel zelf: =([selecteer optische dichtheid] - [selecteer blanco]) of met een rekenmachine.

Selecteer alle cijfers van IE/L en de optische dichtheid.

Maak een grafiek.

Ga naar  "Invoegen", klik bij grafiek de grafiek met de puntjes, en selecteer de grafiek met lijntjes.

Je hebt een grafiek: Maak nu een logaritmische schaalverdeling van de x-as

Ga naar de "+" rechtsboven de grafiek; klik op de > bij "assen"; en ga naar "meer opties"

Maak een logaritmische schaalverdeling van je X-as.

Selecteer de balkjes; klik op "opties voor as", klik op het hokje naast "Logaritmische schaal"

Zo ziet je grafiek er nu uit

De X-as zit nu in een logaritmische schaalverdeling

Op de Y-as zie je de optische dichtheid.

Je moet nu zoeken naar het stukje in je grafiek dat het meest lineair is (zoek dit op internet op als je deze term niet kent).

In dit geval zijn dat de meetpunten tussen een OD van 0,5 en 1,6.

Wij gaan van deze punten een nieuwe grafiek maken.

LET OP: Controleer of deze punten in het meetbereik zitten van de OD van één van je monsters.

Mijn monsters hebben een OD van 1,344 (onverdund- blanco) en 0,919 (5x verdund- blanco).

Met de meetpunten van een OD tussen 0,5 en 1,6 kan ik de antistof concentratie van de monsters berekenen.

Maak een nieuwe logaritmische grafiek van de meetpunten tussen de 0,5 en 1,6

Hieronder in een vogelvlucht hoe je dat ook alweer moest doen.

Maak nu een trendlijn en een formule van het nieuwe grafiek.

Ga naar het plusje van de grafiek; ga naar "meer opties" bij de trendlijn.

Trendlijn + vergelijking

Selecteer "Logaritmisch"; "Vergelijking in grafiek weergeven"; en "R-kwadraat in grafiek weergeven".

Je hebt nu een logaritmische vergelijking én een R-kwadraat. 

De logaritmische vergelijking heb je nodig om de concentratie antistof te bepalen van je monster.

Waar vul je de optische dichtheid van je monster? Bij Y of de X?

1. Y
2. X

Je wilt dus de X bepalen, want de Y is je optische dichtheid.

Mijn formule is: y = 0,3458ln(x) + 0,3239

Ik vul voor y de optische dichtheid van mijn monster 5x verdund, namelijk 0,919 = 0,3458ln(x) + 0,329

Aan beide kanten min 0,329 doen:

0,919 - 0,329 = 0,3458ln(x)

Linkerkant van de formule uitrekenen: dus 0,919 - 0,329 = 0,59

Aan beide kanten delen met 0,3458
0,59 / 0,3458 = ln(x)

Linkerkant van de formule uitrekenen: dus 0,59 / 0,3458 = 1,706

Nu neem je de E macht van 0,1706 , zodat je ln(x) kan oplossen:

e^1,706= 5,5 (opgelost voor x)

Vermenigvuldigen met 5, want de verdunningsfactor was 5.

5,5 * 5 = 27,5 IE/L

Als het kan, doe nu hetzelfde voor je andere cijfer (de onverdunde)

Komen de twee cijfers overeen?

Bij > 10 IE/L heb je een goede bescherming en bij > 100 IE/L ben je levenslang beschermd. Is jouw patiënt levenslang beschermd of heeft die een goede bescherming? Waar zie je dat aan?