Klassikaal: Les 3 BMI

Les 3 BMI

Vandaag:
- uitleg + voorbereiding exp. Proef je PTC? Blz. 9 van het praktijkvoorschrift. (PTC1)

- voorbereiding exp. PCR PTC2 (vrijdag 23 mei)

Planning praktijkles vrijdag

- PCR Alu insert op agarose gel brengen

- nieuw PCR doen: PTC1

Leerdoel

• Je begrijpt hoe genetische variaties invloed kunnen hebben op fenotypische eigenschappen, zoals smaakperceptie.
• Je kan uitleggen hoe PCR en restrictie-enzym analyse gebruikt worden om genetische varianten te detecteren

Welke soorten mutaties ken je?

Heb je wel eens gehoord van PTC?

Ja

Nee

Wat onderzoek je?

Je onderzoekt of je een taster bent, een non-taster of een mild taster door te kijken of je het PCR receptor wel of niet hebt op je tong.

Wat onderzoek je?

Of je bepaalde mutaties in het gen hebt waardoor je smaak verandert. Het gen is 1000 bp lang.

Drie puntmutaties:

- 886 G > A

- 785 C > G

- 145 C > G

In dit experiment onderzoeken we twee puntmutaties:
In deel 1:
- 145 C > G
In deel 2:
- 785 C > G

Vrijdag onderzoeken we eerst plek 145: C > G 

Deel 1: plek 145 C > G

We onderzoeken dit door eerst een PCR te doen, daarna een restrictie enzym analyse.

Wat doet een restrictie enzym?

Met restrictie enzym HaeII

HaeIII herkent GGCC op plaats 145

Drie mogelijkheden:

Fenotype	Restrictie site aanwezig? (Wel GGCC?)	Aantal banden op gel
Taster	Ja	Twee: 44 bp en 177 bp
Mild taster	Één allel wel	Drie: 44 bp, 177 bp, en 221 bp.
Non-taster	Nee	Één: 221 bp

Fenotype	Restrictie site aanwezig? (Wel GGCC?)	Groottes op gel
Taster
Mild taster
Non-taster

Sleep de antwoorden naar het tabel.

Nee

Deels

Ja

44

44

177

177

221

221

Resultaten intepreteren

• Taster (TT): Wel PTC receptor. Twee bandjes: 176 en 45 bp.
• Mild taster (Tt): Deels PTC receptor. Drie bandjes: 221 bp, 176 bp, 45 bp.
  
• Non-taster: Geen PTC receptor. 221 bp.

Twee studenten doen een uitspraak over het experiment.
Student 1 zegt: Als je een PTC receptor hebt, dan ben je een non-taster.
Student 2 zegt: Als je een PTC receptor hebt, dan heb je één bandje op 221 bp.

Welke uitspraak is correct?

1. Student 1
2. Student 2
3. Beide
4. Geen van beide

Planning vrijdag 23 mei

- Restrictie enzym van PCR PTC1 (met HaeII)

- Agarose gel van deze restrictie runnen

- PCR inzetten van PTC2: uitleg hierover en interpreteren resultaten komt op28 mei

Aan de slag

Wat? Maak de zelfstandige Lesson-Up: Zelfstandig: Les 3 BMI.

Hoe? Dit doe je individueel, bij hulp vraag je het eerst je buurman/buurvrouw.

Hoelang? De hele les, op de laatste 5 minuten na.

Uitkomst? Je bent klaar met de zelfstandige LessonUp en begrijpt het experiment beter.

Klaar? Bekijk alvast de LessonUp van Toegepaste Immunologie.

Nu je het papiertje hebt geproefd. Wat voor resultaten verwacht jij?

Je ziet de volgende resultaten op een gel. Alle drie van verschillende mensen.

Sleep de juiste genotype naar de laannummer.

Laan 2

Laan 3

Laan 4

Genotype TT = taster = Wel PTC receptor

Genotype tt = non-taster = geen PTC receptor

Genotype Tt = mild taster = deels PTC receptor

Bij beide PCR's van PTC1 en PTC2 verschilt de concentratie MgCl. Sleep de juiste concentratie MgCl bij de juiste PCR.

PTC2

PTC1

1,5 mM MgCl2

2,5 mM MgCl2

Wat heb je vandaag geleerd?